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DNA和siRNA轉(zhuǎn)染是細(xì)胞生物學(xué)最常見的實(shí)驗(yàn)之一。對(duì)于此類核酸轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)，轉(zhuǎn)染試劑的選擇尤為重要。從嚴(yán)格的專業(yè)角度看，由于DNA和siRNA在分子大小、載電荷以及分子構(gòu)型方面存在較大差異，DNA轉(zhuǎn)染最好選擇專門的DNA轉(zhuǎn)染...

圖a. RNAiMAX轉(zhuǎn)染NC-FAM到Hela細(xì)胞，24h. 圖b. Starvio轉(zhuǎn)染NC-FAM到Hela細(xì)胞，24h. ...

siRNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)已經(jīng)成為分子生物學(xué)研究常做的實(shí)驗(yàn)之一，但很多研究者對(duì)于siRNA轉(zhuǎn)染結(jié)果的判斷還存在模糊認(rèn)知，以至于無(wú)法準(zhǔn)確判定siRNA的轉(zhuǎn)染效率和目標(biāo)基因mRNA或蛋白表達(dá)水平的敲低效果。本文將從siRNA轉(zhuǎn)染陽(yáng)性率、...

實(shí)時(shí)熒光定量（RT-qPCR）想必大家都不陌生，根據(jù)其實(shí)驗(yàn)步驟的不同，可以分為“一步法”與“兩步法”。目前來(lái)說(shuō)，兩步法研究者用的比較多，即是將反轉(zhuǎn)錄和PCR擴(kuò)增分兩步進(jìn)行，首先從RNA模板反轉(zhuǎn)錄得到cDNA，得到的cD...

一、定義與作用原理 脫氧核糖核酸酶I（DeoxyribonucleaseI，DNase I），是一種能夠消化單鏈或雙鏈DNA的內(nèi)切核酸酶。這種酶通常來(lái)源于牛胰腺，是一種廣泛使用的分子生物學(xué)工具。其原理是DNase I能夠水解DNA的磷酸二...

Western Blot（WB），又叫蛋白質(zhì)免疫印跡，是一種基于抗原抗體的特異性結(jié)合，半定量檢測(cè)樣品中某種蛋白的技術(shù)手段。在現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)技術(shù)中，WB仍然是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)研究中最常用的一種實(shí)驗(yàn)方法，整個(gè)...

siRNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)的影響因素有很多，而細(xì)胞狀態(tài)往往是同學(xué)們最容易忽略的一點(diǎn)。如果細(xì)胞狀態(tài)差，那么轉(zhuǎn)染時(shí)就會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞死亡、轉(zhuǎn)染效率低下等結(jié)果。那么關(guān)于細(xì)胞狀態(tài)，我們應(yīng)該注意些什么呢？ 1、使用凍存復(fù)蘇后，已傳...

地高辛標(biāo)記是目前公認(rèn)的最靈敏的DNA和RNA探針?lè)欠派湫詷?biāo)記技術(shù)，適用于Southern雜交、Northern雜交、原位雜交、染色體雜交、斑點(diǎn)雜交和文庫(kù)篩選等幾乎所有的分子雜交場(chǎng)景，應(yīng)用非常廣泛。目前，使用較廣的地高辛標(biāo)記...

一、小核酸轉(zhuǎn)染 siRNA、antisense RNA序列設(shè)計(jì)，siRNA、antisense RNA細(xì)胞株轉(zhuǎn)染，siRNA、antisense RNA原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染，siRNA、antisense RNA活體動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染，基因敲除效果檢測(cè)與分析，RNA干擾全套實(shí)驗(yàn)等； 二、分...